Akademie der Landwirtschaftswissenschaften der DDR Die quantitative Bestimmung des Proteingehaltes der Milch mittels Ultraviolettspektralphotometrie 2. Mitt. Zur Eignung der Differenz der Absorbanzwerte bei 235 und 280 nm fur die quantitative Milchproteinanalytik* w. REICHARDT und E. SCHULER Der Proteingehalt von entfetteter Milch ist nach Verdiinnung mit Alkylpolyglycolathersulfatlosung mit Hilfe von Absorbanzmessungen bei 235 und 280 nm bestimmt worden. Die Differenzder Absorbanzwerte A,,, -Azso weist eine hohe Korrelation zu den Ergebnissen der KJELDAHL-Stickstoffanalyse auf ( r = 0,99). Der Proteingehalt von Caseinat-und Milchserumlosungen konnte analog ermittelt werden. Die Methode besitzt den Vorzug, von der Arninosaurenzusamrnensetzung des Proteins, dern Nucleinsaure-, Salz-. Lactoseund Nichtproteinstickstoffgehalt der Milch weitgehend unabhangig zu sein. Beide Absorbanzwerte sind aus Losungen der gleichen Konzentration bestimmt worden. Es wurde die Abhangigkeit der Mekrgebnisse vom Alter der Losung, vom Alter der Milch und von der Temperatur untersucht sowie die Eignung von Konservierungsmitteln gepruft. Die quantitative Bestimmung des Proteingehaltes der Milch durch Absorbanzmessungen im ultravioletten Spektralbereich (UV) bei 270-280 nm ist von zahlreichen Autoren vorgeschlagen worden [ 1-81, ohne daB sich eine der Methoden in breitem Umfang durchgesetzt hat. Die spektralphotometrische Untersuchung der Milch mit UV-Strahlung wird durch Streulichteffekte erschwert, die auf das Milchfett und die Caseinmicellen zuriickzufuhren sind. Die bisher fur Milchprotein entwickelten Methoden nutzten fast ausschliealich die Absorption der Aminosauren Tryptophan, Tyrosin und Phenylalanin im Bereich von 260 bis 290 nm. Infolge des zwischen den Milchproteinfraktionen wechselnden Gehaltes an aromatischen Aminosauren [9] und deren unterschiedlichen Extinktionskoeffizienten [ 101 ist bei Einzelmilchproben eine exakte Proteinbestimmung nicht immer gewahrleistet. Die Absorption der Proteine im Bereich von 170-240 nm wird nach BEAVEN [lo] im wesentlichen von dem Beitrag der Peptidbindung zur Absorbanz gepragt. Vorschlage zur Nutzung der Peptidbindungsabsorption sind mehrfach veroffentlicht worden [ 1 1-20]. Aus apparativen Griinden und wegen storender Sauerstoffabsorption wurde die MeBwellenlange meist im Bereich von 205-235 nm gewahlt. Die Anwendung dieser Analysenverfahren auf biologisches Probenmaterial, wie Blutserum oder Milch, erfordert jedoch eine Vorbehandlung desselben, um storende Streulichteinfliisse auszuschliefien. RESSLER u. a.