In1 Zusammenhang mit unseren fruheren Uiitersuchungen uber die Wirkungsweise der Cocarboxylasel) hatten wir auch eine eirifache Synthese des Cocarhoxylase-phosphates mitgeteilt. VeZZzt.2, Amiard und Bartos2) haben diese Synthese hierauf weiter atudiert und berichtet. dass sie dahei nicht das Phosphat des Aneurin-pyrophosphor saure-" esters (Cocarboxylase-phosphat) erhielten, sondern Aneurin-triphosphorsaure-ester und sie haben daraus die Schlussfolgerung gezogen, dass auch in dem synthetischen Praparat, das mir seinerzeit heschrieben ha ttenl), derselbe Triphosphorsaure-ester vorgelegeii habe. Die genannten Autoren beachten bei clieser Schlussfolgerung zu wenig, dash sie die Tsolierung der Substanz unter anderen Bedingungen alh wir vornahmen. Wir teilen im folgenden genauere Einzelheiten uber den Mechanismus der Phosphorylierung des Anenrins mit, aus denen hervorgeht , dass unter den von uns seiner Beit angegebenen T-ersuchsbedingangen tatsachlich das Phosphat dcr Cocarboxylase entsteht.
So riel uns bekannt ist, wurde die direkte Phosphor)-lierung eines Alkohols (lurch erhitzte ortho-Phosphorsaure, welche wir fur die Synthese der C'ocarboxylase benutxten, zum crsten I\lale in jener Arbeit s;eiwendet ; dasselbe T'erfahren haben fast gleichzeitig C'herbmlie: und Werziger3) unahhangig 1-on uns fur die Synthese iron ortho-Phosphorsaure-estern gewisser primarer Alkohole benutzt.
Die genauere Untersuchung des Phosphorylierungsvorganges des Aneurins mit crhitzter ortho-Phosphorsaure hat gezeigt, dam, entsprechend den Angaben von VeZZuz und Mitarbeitern, zunachst ein TriphosphorsQure-ester des Vitamins entsteht. Beim Erhitzen der ortho-Phosphorsaure auf uber 350° wahrend einiger Zeit bildet sich aus dieser meta-Phosphorsaure, von aelcher bekannt ist, dass sie in versehiedenen polymeren Formen existiert. Xan kann sich vorstellen. dass eine triniere Form der meta-Phosphorsaure (die cyclisch konstituiert sein kiinnte) die Verbindung ist, welche das Aneurin direkt in den Triphosphorsaureester uberfuhrt. Verschiedene Variationen in den T'ersuchsbedingungen haben gezeigt, dass der Triphosphorsaureester des Sneurins stets als primiires Produkt der Reaktioii gehildet