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Zellatmung und virusenzym

✍ Scribed by B�cker, H. ;Stickl, H.


Publisher
Springer-Verlag
Year
1958
Weight
322 KB
Volume
80
Category
Article
ISSN
0044-2917

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✦ Synopsis


Die Wirkung yon Viren im Organismus geht nieht allein auf ihre intra-cellul~re Vermehrung mit StSrung des gesamten Zellstoffwechsels und schlieglicher Vernichtung der Ze]len zurfiek, sondern aueh auf direkte toxisehe und fermentative Effekte bei Kontakt mit Zellen und Geweben.

Vorliegende Untersuchungen befassen sieh mit einer Xnderung der Zellatmung nach Adsorption des agglutinierenden Influenza-A-Virus (PR 8) an kernhaltige atmende Hiihnererythrocyten, in denen das Virus selbst sich nicht vermehrt.

Material und Methoden

Gewinnung der Hi~hnererythrocyten. Das durch tterzpunktion yon Hi~hnen gewonnene Blur wurde in 3,8~oiger Citratl5sung aufgenommen, 2real vorsichtig abzentrifugiert und jeweils in angew~rmter physiologischer Koehsalzl5sung resuspendiert. Die gewaschenen, frisehen und warmen in KochsalzlSsung suspendierten Hiihnererythroeyten wurden sogleich in die Reaktionsgef&Be des Warburg-Apparats eingeffillt.

Zi~chtung und gewinnung des

Influenza-A-Virus. 9 Tage alte embryonierte Hfihnereier wurden mit 0,2 cm 3 virushaltiger Allantoisflfissigkeit (H. A. 2 -s) in einer Verdiinnung yon 1:4000 beimpft; die beimpften Bruteier wurden bei 38~ inkubiert und nach 18 Std erstmals durehleuehtet; innerhalb dieser Zeit abgestorbene Eier wurden als interkurrenter Ausfall ausgeschieden. Die bei weiteren Durchleuchtungen abgestorbenen Bruteier wurden bis zur alsbald erfolgenden Aufarbeitung in den Kfihlschrank bei 4~ eingelegt. 1Nach Er5ffnen des Eies fiber der Luftblase wurde die Allantoisflfissigkeit mit Ballonpipetten abgesaugt und auf Steriliti~t geprfift. Die Hamagglutinationstiter betrugen 2 -s bis 2 -9. Titerbestimmungen. Die Allantoisfliissigkeit wurde mit gepufferter physiologischer KochsalzlSsung (p~-Wert 7,2) in absteigenden Reihen in Zweierpotenz bei einem Volumen yon 1 cm a ausverdtinnt (SALK) lind mit gewaschenen HiihnerblutkSrperchert (3%) versetzt~. Nach Inkubation yon 20 minim Brutsehrank (37~ und 1 Std im Kiihlsehrank (4~ erfolgte die Ablesung. Der Reziprokwert des letzten l~Shrehens mit deutlicher Agglutination zeigt den H~magglutinationstiter an ; die Virusmenge, die noeh eine deutliehe Agglutination bewirkt, wurde eine Agglutinations-


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