peptiden gegeniiber Wasserstoffperoxid oder ultravioletten Strahlen durch Komplexbildung mit Metallionen wie Cu2+ oder Ni2+ geandert wird: Wahrend freies Polyrnyxin B in wasseriger Losung durch die Einwirkung von H,O, oder UV.-Strahlen keine chromatographisch nachweisbare Versnderung erleidet, wird dessen 1 :1-Komplex mit Cuz+ oder NiZ+ unter diesen Bedingungen in chromatographisch gut diffe-Eeneierbare Bmehsktkke gesplten [I]. Diese Wirkung von kompiex gebundenen Metallionen kann auf einer Beschleunigung und Lokalisierung der durch HaO, bzw. seine Derivate moglichen Abbau-Reaktionen heruhen. Solche Reaktionen sind von Interesse als Modelle fur biologisch relevante Abbauvorgange an Proteinen (vgl. auch [Z]), vor allem aber als neuartige 'Methodik zur Untersuchung von Proteinstrukturen : EinmaI wird der metallkatalysierte H,O,-Abbau ein Polypeptid in andersartige Bruchstiicke zerlegen als z. B. ein hydralytischer Abbau, und damit der Aminosaure-Sequenzanalyse durch den Vergleich uiiberlappender B Bruchstuck-Stntkturen neue Mijglichkeiten eroffnen. Dariiber hinaus konnten sichaus der Art der Bruchstiicke -AufschIiisse uber Nachbarschaftsbeziehungen und Tertiarstrukh des Proteins bzw. seines Metallkomplexes in wssseriger Losung ergeben. In der vorliegenden Arbeit wurden die bei der Einwirkung von H,O, auf den Cu"-Polymyxin-B-Komplex entstehenden Bruchstiicke naher charakterisiert . Ergebnisse und Dtskussion. -In den durch Dunnschicht-Chromatographie (DC; Tab.1) bzw. durch Ionenaustauscher-Chromatographie (IA ; Tab. 2) getrennten Abbau-Peptiden finden sich die vier verschiedenen am Aufbau des Dekapeptides Polymyxin B beteiligten Aminosawen in wechselndem Verhaltnis wieder. Die Tabellen enthalten die Fraktionen nach der bei der Trennung auftretenden Folge sowie derm Charaktprisieriiny diirrh dip CTFTN 8-MnnnF-Analxiw alc nlibmwntitb ---Inplrabis Tetrapeptide A bis F). Die DCFraktionen 7, 8 und 9 sind offenbar identisch und stellen somit eine einzige Fraktion dar. Sie besteht aus einem Hexapeptid (U), in dem alle vier Aminosauren des Polymyxins vorkomrnen. DC-Fraktion 10 enthllt neben EDTA (vgl. Exp. Teil) noch wenig a, y-Diaminobutterenre. die wahrscheinlich von der DC-Nachbarfraktion 9 herruhrt. DC-Fraktian I. muss, wie der Vergleich ihres Rf-Wertes mit dem von a, y-Diaminobuttersaure zeigt, ausser dieser noch weitere Bestandteile enthalten ; das Vorhandensein des Isopelargonsaure-Rates in diesem Bruchstiick kannte den hohen Rf-Wert irn verwendeten Fliessmittel erklaren. 1) 3. Mitteilung iiber Metallionen und H,O,; vorangegangenc Mitteilungen s. [l] und [5].
- Mit 0.1~ HC1 geht die Elution etwas besser. *) Neben den vier in Polymyxin B enthaltenen Aminosauren finden sich in den Wydrolysaten der einzelnen Fraktionen no& wechselnde Mengen anderer Aminosauren, wie z. B. Asparaginsaure. GlutaminsZure, Glycin, Serin, Alanin und Isoleucin. Polymyxin B selbst enthalt diese Aminosiiuren in Spuren als Verunreinigung; wahrscheinlich findet durch die Dunnschicht-Chromatographie eine Anreicharung der Verunreinigungen statt. da bei der Elution diese Aminoshren wohl leichter in &ung gehen als die Oligopeptid-Bruchstiicke.