Bestimmung des Proteingehaltes von Streptomyceten mit Bromphenolblau

✍ Scribed by Dr. M. Hilliger; R. Lindner

• Publisher: John Wiley and Sons
• Year: 2007
• Tongue: English
• Weight: 486 KB
• Volume: 15
• Category: Article
• ISSN: 0233-111X
• DOI: 10.1002/jobm.19750150704

✦ Synopsis

Abstract

Es wurde die Anwendung der von HESSE et al. (1971) beschriebenen Proteinbestimmungsmethode mit Bromphenolblau auf Streptomyceten untersucht. In Ergänzung dieser Methode macht sich bei Verwendung von Streptomyceten ein Ultraschallaufschluß notwendig. Der relative Fehler σ der Mittelwerte von fünf unabhängigen Proteinbestimmungen von ultraschallhomogenisierten Mycelsuspensionen zu je 10 Parallelwerten schwankt zwischen 0,9% und 1,4% und beträgt im Mittel 1,2%. Die Untersuchung der Methodik der Homogenisierung des Mycels mittels Ultraschall ergab unter den gegebenen apparativen Bedingungen eine Mindestbeschallzeit von einer Minute. Die Extinktion des eluierten Farbstoffs ist nahezu linear abhängig von der auf die Filterblättchen aufgebrachten Menge an Protein einer mittels Ultraschall homogenisierten Streptomycetensuspension. Streptomyces hygroscopicus‐Protein und Serumalbumin unterscheiden sich hinsichtlich ihrer Farbstoffbindung kaum, so daß Serumalbumin als Bezugsprotein verwendet werden kann. Es ist sehr wahrscheinlich, daß keine Abhängigkeit zwischen Anfärbbarkeit des Proteins von S. hygroscopicus und der Wachstumsphase bei diskontinuierlicher Kultivierung existiert.