Über ein verfahren zur exakten bestimmung von diffusionskonstanten an ungereinigten enzymen mit hilfe des aktivitätstestes

✍ Scribed by Schulz, Von G. V. ;Laue, D. ;Bodmann, O.

• Publisher: Wiley (John Wiley & Sons)
• Year: 1959
• Weight: 605 KB
• Volume: 31
• Category: Article
• ISSN: 0025-116X
• DOI: 10.1002/macp.1959.020310104

✦ Synopsis

Abstract

Es wird eine vierschichtige Diffusionszelle beschrieben, die aus seches planparallelen Glasplatten mit entsprechenden Bohrungen besteht. Aus der Konzentrationsverteilung in der vier Schichten, die sich nach einer bestimmten Zeit einstellt und mit Hilfe eines biochemischen Aktivitätstestes gemessen wird, errechnet sich die Diffusionskonstante. Eine theroretische und experimentelle Untersuchung der Fehlerquellen ergibt, daß der Fehler in der dritten Schicht bei weitem am geringsten ist, so daß die drei anderen Schichten nur zur Kontrolle des Versuchsablaufes zu verwenden sind. Die aus der dritten Schicht berechneten Diffusionskonstanten sind 2–3 mal genauer als der Aktivitätstest selbst.

Ein erheblicher Überschuß von Fremdprotein hat keinen Eingluß auf die gemessene Diffusionskonstante des als Testprotein verwendeten Notatins. Glukosedehydrogenase aus Aspergillus hat eine wesentlich niedrigere Diffusionskonstante als Notatin.