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Über die Anwendung von Metallpuffern bei Fermentreaktionen. Die pMg-Aktivitätskurve der Hexokinase aus Hefe

✍ Scribed by J. Raaflaub; I. Leupin

Publisher
John Wiley and Sons
Year
1956
Tongue
German
Weight
419 KB
Volume
39
Category
Article
ISSN
0018-019X

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✦ Synopsis

Die pMg-Aktivitatskurve der Hexokinase aus Refel) von J. Raaflaub u n d I. Leupin. (13. 111. 56.) Es ist bekannt, dass die enzymatische Ubertragung des terminalen Phosphatrests des ATPl) auf Glukose durch Zusatz voii Magnesiumsalzen zum Inkubationsmilieu stark bcschleunigt oder uberhaupt erst in Gang gebracht wird. Wie diese Aktivierung zustande kommt, ist nicht sicher festgestellt. L. Berger und Mitarb. "), die Hexokinase aus Hefe isoliert und kristallisiert haben, nehmen an7 dass das aktive Ferment eine Magnesium-Protein-Verbindung ist, wahrend andererseits H . G. Hers3) und C. Lie'becq4) die Ansicht vertreten, dass das eigentliche Substrat der phosphorylierenden Beaktionen der Mg-ATP-Komplex und nicht das freie ATP ist. Die experimentellen Ergebnisse dieser Arbeiten sind jedoch mit beiden Rnsichten uber den Wirkungsmechanismus des Magnesiums gleich gut vereinbar. Wir haben nun versucht, durch Anwendung von Metallpuffern die Abhangigkeit der Hexokinaseaktivitat von der Magnesiumionenkonzentration zu bestimmen und damit zu genaueren Aussagen zu gelangen. Die Ergebnisse dieser Untersuchungen bilden den Inhalt der vorliegenden Mitteilung. Da bei der Ubertragung eines Phosphatrests des ATP auf eine alkoholische Gruppe ein Saureaquivalent frei wird gemass : 0 0 0 4-O O 3-0 2-0 0 0 0 0 0 AOPOPOPO + HOR __+ AOPOPO + OPOR + H+ kann die Hexokinasereaktion im hydrogencarbonathaltigen Milieu direkt manometrisch verfolgt werden. I n Fig. 1 ist eine derart gemessene Versuchsserie mit verschiedenen Enzymmengen graphisch dargestellt. Die Steigung der anfanglich linearen Kurven, bzw. die wahrend der ersten 10 Min. entwickelte (30,-Menge, ist ein Mass der Geschwindigkeit der Hexokinasereaktion, unter der Voraussetzung,

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