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Zum Einfluß mehrwertiger Kationen auf die enzymatische Bestimmung von Glucose mit Glucoseoxydase

✍ Scribed by Krause, W.


Book ID
102213164
Publisher
John Wiley and Sons
Year
1979
Tongue
English
Weight
375 KB
Volume
23
Category
Article
ISSN
0027-769X

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✦ Synopsis


Eisen-bzw. Kupferionen hemmen in einer Konzentration > M die Indikatorreaktion eines Glucoseoxydase-Peroxydase-Reagenzes zur enzymatischen Glucosebestimmung bei Verwendung schwach komplexierender Puffer oder pufferfreier Reaktionsmedien. Durch Zusatz von EDTA, anderer Komplexbildner oder zeitabhangig durch die Pufferionen selbst wird die Hemmung weitgehend beseitigt. Fur den diskutierten Hemmungsmechanismus wird die Beteiligung der Metallionen bei der Reoxydation des Coenzyms der Glucoseoxydase angenommen. Glucoseoxydase (GOD, b-D-Glucose : 0, oxidoreduktase, EC. 1.1.3.4.) aus Penicillium notutum ist ein Flavin-Proteid, das mit hoher Spezifitat die Oxydation von b-D-Glucose zu Gluconolacton katalysiert [ 11. Das Enzym wird durch Quecksilbersalze oder p-Chlormercuribenzoat total inaktiviert [2, 31, wahrend Kohlenmonoxid, Blausaure und ihre Salze sowie Natriumazid, die allgemein als Metallgifte die Oxydasen hemmen, ohne EinfluD auf die Aktivitat sind. Auch Natriumfluorid und Urethan uben keine Hemmung aus [4, 51. 0,Ol M 8-Hydroxychinolin, Semicarbazid sowie Nitrationen hemmen zwischen 10 und 20 % Bei Verwendung von Glucosetestkombinationen aus GOD, Peroxydase (POD) und o-Dianisidin als Farbstoffvorstufe, die mit Phosphat oder Tris-Salzsaure gepuffert werden, sind Storungen durch Metallionen nicht beschrieben worden. Dagegen zeigt das ungepufferte Glucosereagenz (verwendet in Harnzuckertestpapieren) oder bei Verwendung von Maleatpuffer zur Bestimmung von Glucosidaseaktivitaten nach DAHLQWT [7, 81 gelegentlich eine vom Reaktionsmilieu abhiingige verminderte Reaktivitiit.


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