Synthese von Desoxyoligonucleotiden mit der Trichlorathyl-Phosphatschutzgruppe
Aus den1 Max-Planck-lnstitut Fur experimentelle Medizin, Abteilung Chemie, Gottingen (Eingegangen am 29. September 1967) Die Synthese mehrerer Di-und Trinucleotide mittels der Trichlorlthyl-Schutzgruppe am Phosphatrest wird beschrieben. Dabei ergibt sich, daI3 diese Schutzgruppe auch zur Darstellung komplizierter Oligonucleotide geeignet ist, da sie wLhrend der Syntheseschritte bestandig und danach leicht und selektiv in guter Ausbeute abspaltbar ist. Die Identifizierung der Oligonucleotide erfolgte durch Chromatographie, Elektrophorese, UV-Spektroskopie und enzyniatischen Abbau. Die Synthese hoherer Oligonucleotide definierter Sequenzen erscheint zur Zeit am aussichtsreichsten durch Aneinanderfugen vorgefertigter kurzer Oligonucleotide (Blocke) 2.3). Diese Methode erfordert in geeigneter Weise geschiitzte Oligonucleotide mit entsprechendem terminalen Phosphat. Dies mu13 mit einer Schutzgruppe versehen sein, die die Syntheseschritte bis zum Oligonucleotid unversehrt ubersteht, dann aber wieder abgespalten werden kann, ohne daR andere Schutzgruppen oder das Oligonucleotid selbst angegrif'fen werden. Eine Phosphat-Schutzgruppe, die diese Voraussetzungen erfullt, ist die mit Zn abspaltbare P.P. ~-Trichlorathyl-Gruppe4-6), welche sich bereits bei der Darstellung mehrerer Oligonucleotide, z. B. d-pTpTpTpT, d-pTpTpTpC und d-pCpTpTs), bewahrt hat. Im folgenden wird uber die Darstellung einiger weiterer Oligonucleotide mit dieser Schutzgruppe berichtet, deren grundsatzlichen Weg das Schema zeigt7).