Protein Engineering of AMDase G74C, a Cofactor-Independent Racemase
✍ Scribed by R. Kourist; Y. Miyauchi; K. Miyamoto
- Book ID
- 102085463
- Publisher
- John Wiley and Sons
- Year
- 2010
- Tongue
- German
- Weight
- 82 KB
- Volume
- 82
- Category
- Article
- ISSN
- 0009-286X
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✦ Synopsis
werden können. Auûerdem ermöglicht die kontinuierliche Beobachtung der Reaktionskomponenten während chemooder biokatalytischer Umsetzungen eine direkte Kontrolle des Prozesses. Das Ergebnis bei korrekter Anwendung ist ein erhöhter Informationsgehalt, der aus den Messungen gewonnen werden kann. Benzoylformiatdecarboxylase (BFD) aus Pseudomonas putida katalysiert die enantioselektive Carboligation verschiedener Aldehyde zu den entsprechenden chiralen 2-Hydroxyketonen, welche wichtige Intermediate für die pharmazeutische und chemische Industrie darstellen. Die Wildtypform (wtBFD) katalysiert die Synthese von (S)-2-Hydroxypropiophenon (HPP) aus Benzaldehyd und Acetaldehyd in Gegenwart von Thiamindiphosphat (ThDP)[1]. Die zweidimensionale Fluoreszenzspektroskopie wurde als eine effiziente Methode für die Online-Überwachung der wtBFD-katalysierten Carboligation identifiziert. Die Analyse der Fluoreszenzspektren erfolgte durch chemometrische Modellierung mittels Principle Component Analysis (PCA) und Partial Least Square (PLS) Regression. Anhand der abgeleiteten chemometrischen Modelle wurden offline gemessene Konzentrationen vom Reaktionsprodukt 2-HPP und dem Substrat Benzaldehyd mit einem Root Mean Square Error of Calibration (RMSEC) von 2,3 % (2-HPP) und 4,7 % (Benzaldehyd) validiert [2].
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