„Programmierte” Selbstorganisation von Kupfer(II)-L- und -D-Arginin-Komplexen mit aromatischen Dicarboxylaten unter Bildung von chiralen Doppelhelices

✍ Scribed by Nayumi Ohata; Dr. Hideki Masuda; Prof. Dr. Osamu Yamauchi

• Publisher: John Wiley and Sons
• Year: 1996
• Tongue: English
• Weight: 623 KB
• Volume: 108
• Category: Article
• ISSN: 0044-8249
• DOI: 10.1002/ange.19961080510

✦ Synopsis

ZUSCHRIFTEN C Ahh. 2. Die transiente Ah-und Loslosung von Kettensegmenten eng superspiralisierter DNA-Molekiile, die an Muskovit adsorhiert sind wie in (a), wird durch sich offnende und ver-groBernde Schleifen wie in (h) und (c) durch topologische Einschrankungen ,,eingefangen" und sichtbar gemacht. Die Balken entsprechen 100 nni. ralisierungs-Torsionsspannung in der Nahe der zuvor durch UV-Bestrahlung induzierten Strangbriiche zu entspannen (Abb. 1 b). Die Zahl der Strangbruche beeinflufit daher die Empfindlichkeit dieses experimentellen Ansatzes[13]. Wenn die Haufigkeit der Strangbruche uber die Kette verteilt groB ist, wird die Superspiralisierung jedes sich vom Substrat ablosenden Kettensegments entspannt. Sogar auDerst geringe und tran~iente"~] Bewegungen einzelner adsorbierter Molekule, die nur sehr schwer mit anderen physikalischen Methoden, selbst mit direkter SFM-Abbildung in Losung, zu entdecken waren, konnen rnit dieser Methode ,,eingefangen" und nachgewiesen werden - ohne das Risiko, sie rnit der Abtastspitze zu induzieren. Chemische Topologie stellt permanente interne Marker fur jede Art von molekularem Vorgang zur Verfugung, der rnit Bindungsbruchen und -neuknupfungen einhergeht, unabhangig davon, wie kurzlebig die molekularen Struk- turen sind und wie schnell und transient der ProzeB ist['']. SFM-Abbildung in Kombination rnit topologischen Einschrankungen kann es ermoglichen, diese Prozesse ,,einzufangen" und zu untersuchen, ohne in ihre Dynamik einzugreifen (Abb. 2). Experimentelles 20 pL einer HEPES-Pufferlosung, die 1 pg m L -' superspiralisiertes pBR322-DNA-Plasmid und 30 mM MgCI, enthielt. wurde auf eine Scheihe aus fi-isch gespaltenem, ruhinrotem Muskovit (Glimmer) gegeben. Die iiberschiissige Losung wurde rnit Filterpapier ahgeloscht, die Prohe knrz rnit einigen Tropfen Wasser gespiilt, in einem schwachen Stickstoffstrom getrocknet und 90 s in einer kleinen Kammer mit drei 1 SW-Hg/Xe-Lampen hestrahlt. Danach wurde sie niit der Oherseite nach ohen unterschiedlich lang in ein Gefan rnit etwa 50 mL entionisiertem, doppelt destilliertem Wasser, das im Argonstrom von Luft hefreit worden war, getaucht. Die Prohen wurden abgetupft. wiederum getrocknet und schlieBlich in einer trockenen Stickstoffatmosphare mit emem Tapping-Mode-Rasterkraftmikroskop (Nanoscope 111, Digital Instruments, Santa Barbara, CA) ahgehildet. Die urspriingliche DNA-Prohe war, wie eine Elektrophorese-Untersuchung auf Agdrose ergah, zu mindestens 95 % superspiralisiert. Lineare Molekiile und solche rnit einfachen Stranghriichen wurden durch Behandlung der nativen E.-coli- pBR322-DNA-Proben rnit Exonuclease I11 [15] entfernt, um die Ahlagerung hereits entmannter DNA-Molekiile auf dem Muskovit zu vermeiden.