Enzymes o/Carbohydrate Metabolism in Nectaries Summary. 1. The activity of some important enzymes of carbohydrate meta- bolism was investigated in several fractions of homogenized tissues of nectaries from Deutzia scabra and Convolvulus sepium in the secretion-phase. Considerable activity was found for the particle-associated hexokinase and the soluble ffuctokinase, phosphohexoseisomerase, sucrase, UTP-glucose-l-phosphate-uridyltransferase, acid and alkaline phosphatases, and pyrophosphatase. The activity of phosphoglueomutase was smaller, and that of starch-hydrolases and -phosphorylases and of sucrose-synthetase was very weak.
- The meaning of these results in relation to the metabolism and the secretion of carbohydrates in nectaries is discussed.
I n einer frfiheren l~bersicht (ZIEGLER, 1966) wurden die wichtigsten U m s e t z u n g e n der Kohlenhydrate, wie sie fiir die Nektariengewebe anz u n e h m e n shad, skizziert. Dabei wurde kurz erw/ihnt, da$ eine Reihe yon wesentlichen E n z y m e n y o n uns getestet wurden. Hierfiber soll im folgenden berichtet werden.
M a t e r i a l u n d M e t h o d e n
Blfiten yon Freilandpflanzen yon Deutzia scabra T~vwB. und Convolvulus sepium (L.) R.BR. wurden gesammelt, ihre Nektarien (im sezernierenden Zustand) herauspr/ipariert und eingefroren. Zur Gewinnung der Gesamtextrakte wurden die Gewebe in 0,02 M Glycylglyein-Puffer (pH 7,3) in einem Potter-Elvehjem-Homogenisator zerkleinert. Da auch die Verteflung der EnzymaktivitEten auf die einzelnen Zellfraktionen interessierte, wurde die Eignung der Fraktionierungsmethoden yon W.D. BoNNER (1965) und yon HACKETT (1961) fiir unsere Nektariengewebe gepriift. Dazu wurden die Fraktionen entweder in Glutaraldehyd (12%, 48 Std) 1% OsO 4 (2 Std) oder in 1% OsOa (2 Std) mit Nachkontrastierung in 0,5% Uranylacetat ~ Phosphorwolframs~iure fixiert, in Vestopal eingebettet, mit dem LKB Ultrotom geschnitten und die Schnitte im Zei$-EM9 betrachtet.
Die elektronenoptischen Erfahrungen liei~en uns die (einfachere) Methode yon HACKETT nach geringfiigiger Abanderung als geeignet erscheinen. Es wurden dabei --falls niehts anderes angegeben --die gefforenen Deutzia-Nektarien in einer Reibsehale mit dem gleichen Gewicht Medium (bestehend aus: 0,3 M Mannit; 0,05 M Glyeylglycin-Puffer pH 7,5; 0,001 M EDTA und 0,05% Cystein) homogenisiert und durch eine Perlongaze filtriert. Der Rfickstand wurde wieder mit der gleiehen Menge Medium verrieben und erneut Iiltriert. Der Extrakt wurde dann in der Kiihlzentrifuge Iraktioniert.