Enterokinase: Ein Werkzeug für die Spaltung von Fusionsproteinen

✍ Scribed by T. Kubitzki; U. Mackfeld; T. Noll; S. Lütz

• Publisher: John Wiley and Sons
• Year: 2009
• Tongue: German
• Weight: 63 KB
• Volume: 81
• Category: Article
• ISSN: 0009-286X
• DOI: 10.1002/cite.200950257

✦ Synopsis

Für das Inhibitorprotein Barstar wurmithilfe sehr schneller H/D-Austauschtechniken die Dynamik des nativen Moleküls charakterisiert und mit den aus Stopp-Flow-Fluoreszenzmessungen gewonnenen Entfaltungskonstanten verglichen. Aus den Ergebnissen kann abgeleitet werden, dass der Entfal-tungsweg von Barstar mit der Dynamik des nativen Proteinmoleküls gekoppelt ist.

In Mutationsstudien von Onconase, einem zytotoxischen Strukturhomologen von Ribonuclease A, wurde gezeigt, dass eine der vier Disulfidbrücken entscheidend zur hohen Stabilität dieses Enzyms beiträgt. Die Analyse des Faltungsweges der Wildtyp-Onconase und einer Variante ohne diese C-terminale Disulfidbrücke mittels Fluoreszenz-und NMR-Spektroskopie weist Unterschiede in der Bildung eines Faltungsintermediats auf, die mit Flexibilitätsunterschieden im nativen Zustand korrelieren.