Ein neuartiger Bindungstyp eines Cyanometallat-Liganden: Synthese und Struktur des Mn4Pd4-Clusters [(OC)Pd(μ-NC)Mn(η-C5H4Me)(CO)2]4 mit orthogonal angeordneten helicalen Einheiten
✍ Scribed by Dr. Pierre Braunstein; Benoít Oswald; Prof. Antonio Tiripicchio; Prof. Marisa Tiripicchio Camellini
- Publisher
- John Wiley and Sons
- Year
- 1990
- Tongue
- English
- Weight
- 460 KB
- Volume
- 102
- Category
- Article
- ISSN
- 0044-8249
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✦ Synopsis
gerer UberschuB an Nucleophil ['I, was die Aufarbeitung der Peptide erleichtert. Bei einigen Carboxypeptidasen sind Amide als Nucleophile fur die Peptidsynthese obligatorische Substrater6'. Wegen der Schwerloslichkeit vieler Peptidsubstrate in Wasser wurde der EinfluB organischer Losungsmittel, die mit Wasser mischbar sind, auf die StabilitPt der Peptidamidase untersucht. Die Ergebnisse zeigt Abbildung 2. Die geringsten Aktivitatsverluste traten mit Dimethylformamid (DMF) auf: nach drei Tagen Inkubation in DMF/H,O 30/70 bei 30 "C waren noch ca. 30 YO der urspriinglichen Aktivitat vorhanden. Experimen telles Das Enzympraparat wurde aus dem Flavedo von Orangen, d. h. aus der a u k rsten farbigen Schicht der Schalen. iiber eine zweistufige Reinigung durch fraktronierende Salzfallung und Ionenaustauschchromatographie gewonnen. Die Peptidamidase hatte je nach Substrat eine Aktivitat von 2 bis lOOU rng-l. wobei bei einer Aktivitat von 1 U ein pmol Produkt pro Minute bei 30°C und pH 7.5 umgesetzt wird. Sofern nicht anders angegeben, wurden 10-50 mM Peptidamid in 50 mM Tris/HCI-Puffer. pH 7.5 mil 20-40 pg mL-' Peptidamidase umgesetzt. Die Bestimmung und Quantifizierung der Peptide erfolgte durch HPLC an einer RP-18-Siule. die isokratisch mil TBA/Acetonitril unterschiedlicher Zusamrnensetzung als Laufmittel und einer FlieBgeschwindigkeit von 1.0 mL min-' eluiert wurde. Detektiert wurde im Absorptionsmaximum des jeweiligen Substrates. Die Laufmittelzusammensetzung ist in Tabelle 1 angegeben. In allen Experimenten wurde nur ern neuer Peak im Chromatogramm beobachtet. dessen Flache selbst nach 24-48 h Inkubation unverandert und dessen Retentionszeit rnit der einer Referenzprobe (soweit verfiigbar) identisch war. Folgende Referenzsubstanzen von Bachem. Heidelberg, wurden zur Produktidentifizierung verwendet :