Détermination du rapport molaire galactose/mannose dans les glycoprotéines à l'aide de la chromatographie sur couche mince de cellulose
✍ Scribed by Claude Nicot; Rose-Irène Cheftel; Jean Moretti
- Publisher
- Elsevier Science
- Year
- 1967
- Tongue
- English
- Weight
- 402 KB
- Volume
- 31
- Category
- Article
- ISSN
- 1873-3778
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✦ Synopsis
DQterminatSon du rapport molaire galactose/mannose dans les glyeoprot&nes B I'aide de la chromatographie sur Gauche minee de cellulose L'Qvaluation du rapport molaire galactose/rnannose clans les glycoprotdines est un probleme encore ma1 resolu. On a propose diverses methodes qui, pour une m$me glycoproteine, aboutissent a des resultats variables. Ces divergences proviennent d'une part des conditions d'hydrolyse pour libkrer les oses-conditions variables d'une methode a l'autre -et, d'autre part, des pro&d&s de dosage des oses ainsi libdres. Le dosage direct par spectrophotometrie, effect& sur le melange de galactose et de mannose chauffe en pr8sence d'orcinol sulfurique, n'aboutit pas a une valeur t&s sure. Certains 'auteurs lisent les absorptions a 425 et 520 m,ur, d'autres a 475 et 516 m,u2. Mais selon la valeur du rapport galactose/mannose, les courbes d'etalonnages sont differentes. Et de plus, les intensites varient avec la duree et la temperature de l'hydrolyse. Seules les methodes qui &parent le galactose et le mannose par chromatographie avant leur dosage donnent des resultats satisfaisants, & condition d'effectuer les hydrolyses de maniere a liberer entierement les oses sans les detruire. Pour &parer les oses, on utilise essentiellement la chromatographie, soit sur papier3, rt soit sur couche minces, beaucoup plus rapide. On a rdcemment ddcrit une mdthode de separation sur r&sines qui ndcessite un Autoanalyseur et un appareillage assez compliqu@. Nous avons mis au point une technique simple et rapide et qui utilise la chromatographie sur couche mince de cellulose. Nous en donnerons la description et la precision qu'on peut en attenclre. Nous l'avons appliqude a la determination du rapport molaire galactose/mannose clans les haptoglobines d'Homme Hp I-I et de Lapin. Nous comparerons nos resultats & ceux des autres'auteurs'qui ont aborde ce probleme. Mat&ids et me'tlzodes