1H-NMR-Untersuchungen zur Spaltspezifität von α- und β-d-Glucosidasen gegenäber Disacchariden. II
✍ Scribed by Rudi Wajda; Mario König; Horst Ludwig; Sigrid Mronga; Horst Friebolin
- Publisher
- Elsevier Science
- Year
- 1992
- Tongue
- English
- Weight
- 608 KB
- Volume
- 235
- Category
- Article
- ISSN
- 0008-6215
No coin nor oath required. For personal study only.
✦ Synopsis
H NMR spectroscopy was used to determine the rate of enzymic hydrolysis of six disaccharides having o-glucose units, i.e., cellobiose, laminarabiose, gentiobiose, maltose, nigerose, and isomaltose. /?-o-Glucosidase from sweet almonds was used to hydrolyze the three B-o-glucosidic-linked disaccharides, and the three a-o-glucosidic-linked disaccharides were, hydrolyzed by maltase from bakers yeast. The results showed that the rate of hydrolysis depends strongly on the position of OH-l. The kinetic investigation directly yielded the quotient of the first order velocity constants for the enzymic hydrolysis of the two anomers at low substrate concentrations (substrate cont. < Michaelis constant). The major effects found for /%linked disaccharides were that the a anomer of gentiobiose is hydrolyzed five times faster than the B anomer, and for laminarabiose, the p anomer is hydrolyzed 50 times faster than the (Y anomer. No anomer of cellobiose was preferred. For the a-linked disaccharides, the cleavage of cr-maltose is three times faster than that of p-maltose; for nigerose, the position of OH-l has no influence on the rate of hydrolysis, and the hydrolysis of isomaltose is too slow, hence 'H NMR spectroscopy gives no evidence of the specificity of the enzyme used, maltase.
Zusammenfassung
Mit Hilfe der 'H-NMR-Spektmskopie wurde die Geschwindigkeit der enzymatischen Hydrolyse von sechs aus o-Glucose aufgebauten Disacchariden, Cellobiose, Laminarabiose und Gentiobiose, sowie Maltose, Nigemse und Isomaltose, untersucht. Fiir die Spaltung der P-glucosidisch verkniipften Disaccharide diente p-o-Glucosidase aus SiiBmandeln, fur die der a-verknilpften Disaccharide Maltase aus Backerhefe. Die Untersuchungen ergaben, dal3 die Hydrolysegeschwindigkeit stark von der Stellung von OH-l abhangt. Die kinetischen Messungen liefern direkt den Quotienten der Geschwindigkeitskonstanten erster Ordnung fur die enzymatische Hydrolyse der beiden Anomere bei niedriger Substratkonzentration (Substratkonzentration < Michaeliskonstante). Besonders groge Effekte wurden bei den /3-verkniipften Disacchariden gefunden: Von Gentiobiose wird das a-Anomer ungefahr fiinfmal schneller gespalten als das @-Anomer, von Laminarabiose dagegen ungefahr fiinfzigmal langsamer. Bei